western blot(Western blot的原理操作及注意事项)_环球今亮点

2023-05-29 12:26:46 来源:互联网


(资料图)

相信目前很多小伙伴对于Western blot的原理操作及注意事项都比较感兴趣,那么小搜今天在网上也是收集了一些与Western blot的原理操作及注意事项相关的信息来分享给大家,希望能够帮助到大家哦。

1、Lowry法:此法是双缩脲法的进一步发展。

2、他的第一步就是双缩脲反应,即Cu++与蛋白质在碱性溶液中形成络合物,然后这个络合物还原磷钼磷-磷钨酸试剂(福林-酚试剂),结果得到深蓝色物。

3、此法比双缩脲法灵敏得多,适合于测定20mg/L~400mg/L含量的蛋白质溶液。

4、其干扰物质与双缩脲法相同,而且受他们的影响更大,硫醇和许多其他物质的存在会使结果严重偏差。

5、另外要注意的是,加入福林试剂时要特别小心,试剂只在酸性pH环境中才稳定,上述提到的还原反应只有在pH10时才发生,因此,福林试剂加入到碱性的Cu2+-蛋白质溶液中时,必须立刻搅拌,以使磷钼酸-磷钨酸试剂在未被破坏之前能有效地被Cu2+-蛋白质络合物所还原。

本文到此结束,希望对大家有所帮助。

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